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    关于Cosmobio purefrex产品介绍

    2021-08-09
    浏览次数: 411

    PUREfrex®  ——重组无细胞蛋白合成系统

    PUREfrex®是一种基于PURE系统技术新开发的体外转录/翻译偶联系统,与S30体外翻译系统不同,PUREfrex®是重组无细胞蛋白合成系统,反应系统由蛋白质、核糖体、氨基酸和NTPs组成。只需将编码感兴趣蛋白质的DNA(mRNA)与试剂盒中溶液I、IIIII混合,37℃孵育反应数小时,即可完成蛋白质合成。构成PUREfrex®试剂盒的蛋白质、核糖体和tRNA的制备方法较原PURE体系有所改进,减少了与蛋白质合成无关的污染物质。且PUREfrex®试剂盒中所含的翻译因子和其他蛋白均不包含标签序列,后续可添加任何标签来纯化和检测合成的蛋白质。


    关于Cosmobio purefrex产品介绍


    〉参考文献
    Shimizu et al. (2001) Nat. Biotechnol., vol. 19, p. 751. PubMed ID: 
    11479568
    Shimizu et al. (2005) Methods, vol. 36, p. 299. PubMe ID: 
    16076456

     

    产品特点

    ● 消除了细胞提取物中的杂蛋白,合成的表达产物分辨率更高;

    ● 可以同时加入多种模板进行反应,以合成Fab及多聚体;

    ● 可直接使用PCR产物来作为模板DNA;

    ● 单位体积内合成的蛋白量几乎恒定;

    ● 操作简便,37℃数小时即可合成;

    ● 所有的蛋白成分均不包含标签序列,可使用任何标签来纯化和检测合成的蛋白质;

    ● 可合成活细胞难以合成的强毒性蛋白。

     

    PUREfrex®不同版本的选择 

    PUREfrex®2.0 - 蛋白质合成量更高,大大降低了RNaseß-半乳糖苷酶的污染,并将每1µL反应混合物的脂多糖(LPS)水平降低至约0.1 EU。

    PUREfrex®2.1 -  2.1版本试剂盒以2.0版本为基础,未预混还原剂。主要用于合成含有二硫键的靶蛋白。

    PUREfrex®1.0 - 蛋白质合成量少于2.02.1版本,但1.0版本反应组分的完整信息已公开。

    PUREfrex®1.0 Custom - 厂家可提供基于PUREfrex®1.0试剂盒的定制产品。

     

    PUREfrex®2.0试剂盒

    PUREfrex®2.0PUREfrex® 1.0的优化版。大大减少了RNaseβ-半乳糖苷酶的污染,此外,每1µL反应混合物的脂多糖(LPS)水平降低至约0.1 EU。与PUREfrex®1.0相比,蛋白质合成量提高了2-10倍。

    关于Cosmobio purefrex产品介绍 

    1. 合成原核及真核生物蛋白质的结果显示:与PUREfrex®1.0相比,使用PUREfrex®2.0合成时,以上6种蛋白质的合成量都有增加。

     

    关于Cosmobio purefrex产品介绍

    2. 与原始PURE系统相比,PUREfrex®2.0大大减少了RNaseβ-半乳糖苷酶的污染,此外,每1µL反应混合物的脂多糖(LPS)水平降低至约0.1 EU。PUREfrex®2.0组分的改进纯化大大降低了污染物的水平。

     

    PUREfrex®2.0试剂盒组成

    试剂

    体积

    组分说明

    Solution I

    125 µL

    氨基酸, NTPs, tRNAs和酶底物等

    Solution II

    12.5 µL

    蛋白质(30%甘油缓冲液中)

    Solution III

    25 µL

    核糖体(20 µM

    DHFR DNA

    10 µL

    含有大肠杆菌二氢叶酸还原酶(DHFR)基因的PCR产物作为阳性对照。(20 ng /µL)


    产品列表

    产品名称

    规格

    总反应体积

    试剂盒

    PUREfrex®2.0

    GFK-PF201-0.25-EX

    250 μL

    GFK-PF201-0.25-5-EX

    250 μL×5

    PUREfrex®2.1

    GFK-PF213-0.25-EX

    250 μL

    GFK-PF213-0.25-5-EX

    250 μL×5

    PUREfrex®1.0

    GFK-PF001-0.25-EX

    250 μL

    GFK-PF001-0.25-EX

    250 μL×5

    PUREfrex®补充试剂(请根据用途选择蛋白质合成反应液和添加剂)

    DnaK Mix

    GFK-PF003-0.5-EX

    用于500ul的反应混合物

    GroE Mix

    GFK-PF004-0.5-EX

    用于500ul的反应混合物

    DsbC Set

    GFK-PF005-0.5-EX

    用于500ul的反应混合物

    PDI Set

    GFK-PF006-0.5-EX

    用于500ul的反应混合物

    EF-P

    GFK-PFS052-0.5-EX

    用于500ul的反应混合物




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