Cosmobio水凝胶

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◆ 物理特性

● 当温度高于37℃，甚至高于60℃时，水凝胶将会发生什么变化？

随温度升高水凝胶将会变硬。

● 在0-60℃温度范围内，溶胶/凝胶/水凝胶发生相态变化的温度范围分别是多少？凝胶相可逆变化的温度范围是多少？

0℃-15℃：溶胶

15℃-20℃：溶胶和凝胶的中间体

20℃：相态变化的温度转折点

20℃以上：水凝胶

37℃以上：随温度升高，水凝胶开始变硬。

● 二氧化碳和营养物质是如何供给细胞的？在水凝胶状态下可以溶解到细胞内吗？

可以的，营养物质和二氧化碳在水凝胶中通过多层营养培养基扩散进入细胞。

● 温度为37℃时水凝胶的结构强度是多少?

关于此问题，请参考以下的参考文献：

Yoshioka H et al, A Synthetic Hydrogel with Thermoreversible Galation and Rheological Properties, Journal of Macromolecular Science, Part A: Pure and Applied Chemistry Volume 31, Issue 1, 1994

● 水凝胶上有小孔吗？

水凝胶上没有任何空隙或小孔。

● 凝胶对二氧化碳、氮气和氧气是可渗透的吗？

是的，二氧化碳、氮气和氧气的可以通过凝胶渗透。

● 当Mebiol Gel®处于水凝胶状态时，细胞会被水凝胶包围，那有足够的空间供细胞生长吗?

即使当Mebiol Gel®处于凝胶状态即37℃时，其交联点也是可变的，即会随细胞形态的变化而变化，且没有空隙或间隙。

● 在适当的温度下，Mebiol Gel®从溶胶变成凝胶需要多长时间？

3分钟

● 溶胶-凝胶的转换可以重复多少次？

正常情况下溶胶-凝胶相互转换可重复多次，直到Mebiol Gel®被化学分解。另外，溶胶-凝胶相互转换的次数取决于稀释后的储存温度或氧密度。稀释后若置于4℃储存，Mebiol Gel®可稳定1-2个月的时间，若分装后置于-20℃或-80℃储存，则可稳定更长的时间。

● 多大分子量的营养物质可通过凝胶？营养物质的移动距离与分子量之间有什么相关性呢？

可通过37℃水凝胶扩散的营养物质的最大分子量约为10000‐90000（确切尺寸未知）。如果营养物质的分子量为数千，即1000-9000，在凝胶中扩散是没有问题的。但如果营养物质的分子量超过9000，那在扩散的时就有问题了。营养物质自身的分子量越小，在水凝胶中移动的距离就越长。

● 是否可以提供在37℃时水凝胶的孔隙率数据？

非常抱歉，Cosmobio没有任何关于凝胶孔隙率的数据。但是，以下参考文献的讨论部分有关于“凝胶在不同材料中的扩散速度”的信息，可供参考。

Takao et al., Novel drug delivery system using thermoreversible gelation polymer for malignant glioma Journal of Neuro-Oncology (2005)

一般情况下，当凝胶浓度较低时，凝胶在物料中的“扩散速度”较高。因此当凝胶浓度较低时，凝胶孔隙度较高。但当凝胶浓度较低（如5%）时，不会形成凝胶。

● Mebiol Gel®最小凝胶质量分数（wt%）是多少?

最小的胶浓度大概是7 wt%。Cosmobio推荐加1 g的聚合物至10 g培养基中，这样制出来的胶浓度为9 wt%

◆ Mebiol Gel®和兼容的细胞类型问题

● 当在37℃下培养细胞时，是否可以交换培养基的类型？

当处于37℃时，凝胶不会溶于过量的水。因此，您可以将凝胶上的培养基分层，这样就可以交换分层后的培养基。

● 当细胞在生长过程中接触到水凝胶的边缘时会受到任何阻力吗?

不会。

● Mebiol Gel®是否适用于T细胞或MSC细胞的培养?

Cosmobio没有任何关于在Mebiol Gel®中培养T细胞的数据。关于MSC细胞培养，请参考以下的参考文献：

Yuguo Lei et al., PNAS PLUS E5039E5048 doi: 10.1073/pnas.1309408110

● 请问Mebiol Gel®已经成功培养过哪些类型的细胞？

请参考Cosmobio官网所列的使用Mebiol Gel®培养细胞已经发表的参考文献，链接如下：

http://export.cosmobiousa.com/contents/mebiol_lit_ref.html

● 请问可以使用Mebiol Gel®培养人肺上皮细胞吗？是否可以提供相关的参考数据？

非常抱歉，Cosmobio没有任何关于使用Mebiol Gel®培养人肺上皮细胞的数据。

● Mebiol Gel®是否已经被报道用于培养肠细胞？是否有可支持的参考文献？

非常抱歉，Cosmobio没有任何关于使用Mebiol Gel®培养肠细胞的数据。

● 在溶液状态下，提取细胞时是否会损伤细胞？

不会的。

● Mebiol Gel®是否可被用于流式细胞术？如果可以的话应该使用哪种状态的凝胶？

可以的，当Mebiol Gel®在低温下处于溶胶状态是可以被用于流式细胞术。

● Mebiol Gel®是否可被用于体内实验？如果可以的话，它可以在小鼠体内保留多长时间？

可以的，Mebiol Gel®可以被用于除人以外的其他物种的体内实验。它可以以凝胶的形式在大鼠脑内保留至少28天。更多的信息可以参考以下的参考文献：

T. Ozeki, K. Hashizawa, D. Kaneko, Y. Imai, H. Okada, “Treatment of rat brain tumors using sustained-release of camptothecin from poly(lactic-co-glycolic acid) microspheres in a thermoreversible hydrogel”, Chem. Pharm. Bull. 58 (9), 1142-1147 (2010)

● Mebiol Gel®对细胞具有毒性吗？如果有的话，对哪些类型的细胞可能会产生毒害作用？

Mebiol Gel®对所有的细胞均是无毒的。

● 有关于使用Mebiol Gel®培养正常或癌变的甲状腺细胞的参考文献吗？

有的，请参考以下已发表文献：

Production of hepatitis C viruses (HCV) by 3-D culture of human hepatocyte cell line・ “Production of infectious hepatitis C virus particles in three-dimensional cultures of the cell line carrying the genome-length dicistronic viral RNA of genotype 1b“ Virology, 351 (2), 381-392 (2006)

◆ 其他问题

● Mebiol Gel®可以室温储存吗？

可以的，粉末状的Mebiol Gel®应置于室温储存。

● Mebiol Gel®的有效期是多久？

Mebiol Gel®的有效期为发货之日起一年。

● Mebiol Gel®一次性未能用完，若将剩余的凝胶置于4℃储存，可储存多长时间？

大约一个月的时间，若要长期储存，请置于-20℃或-80℃。

● Cosmobio可以提供Mebiol Gel®的试用装吗？

非常抱歉，Cosmobio不提供Mebiol Gel®的试用装。

● Cosmobio如何对Mebiol Gel®进行消毒？凝胶里会有一些活体生物吗？

Cosmobio使用EOG对凝胶进行消毒，凝胶里应该不含任何生物。

● 当使用10 mL和50 mL的Mebiol Gel®培养细胞时，应该使用多大规格的培养瓶？

应分别使用T-25和T-75的培养瓶。

● 当重悬Mebiol Gel®时，可以使用质量分数为20%的Mebiol Gel®作为储存原液，而非10%吗？因为我希望在后续的实验中使用其他类型的培养基去进一步稀释。

可以使用20%的Mebiol Gel®代替10%的作为储存原液。但是，请注意20%的高浓度重悬液具有很高的粘度，即使在低温下也具有较低的流动性。

● 说明书中推荐使用10 mL的培养基溶解Mebiol Gel® (MBG-PMW20-1001)。可以使用更大体积的培养基去溶解吗？

一般情况下，Cosmobio推荐使用10 mL的培养基溶解10 mL的Mebiol Gel®。如果您希望溶解50 mL的Mebiol Gel®，则需要加入50 mL的培养基。如果低于这个浓度的Mebiol Gel®溶液，则很难形成凝胶。例如，如果您使用20 mL的培养基去溶解10 mL的Mebiol Gel®，则很难获得凝胶。

● 每瓶中含有多少克的Mebiol Gel®？

10 mL规格的Mebiol Gel®溶液中含有1.0 g的Mebiol Gel®，50 mL的Mebiol Gel®溶液中含有5.0 g的Mebiol Gel®。

● 包装瓶中的粉色药片是什么？

是氧气检测试剂。与Mebiol Gel®一起，作为氧气和水分的吸收剂，但非产品的一部分。

● 可以制备的Mebiol Gel®凝胶浓度最高是多少？

最高浓度大约为15 wt%。如果浓度再高，其黏性会随着浓度的升高而增大，进而导致Mebiol Gel®即使在低温状态下也无法使用，例如在20 wt%浓度下就已经无法使用

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