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抗体挑选的四个原则

2023-06-06
浏览次数: 92

1.要测谁?

确认目标蛋白特性

抗体挑选的四个原则


2.谁去测?

抗体种类

a.单克隆:专一性高,灵敏度较多克隆低

b.多克隆:灵敏度高,批次差异较大

c.重组抗体:批次差异小


抗体验证

抗体挑选的四个原则


3.被谁测?

一抗二抗配对

a.兔配兔,鼠配鼠,一抗二抗想配不出错

b.做免疫组化如一抗宿主种属和样本种属来源相同时,需要注意样本内源性IgG是否与二抗结合产生假阳性


呈色方式

a.HRP,AP呈色

b.荧光(多染时抗体种属或亚型不相同,使用的荧光波长不相近)


二抗专一性

a.使用交叉预吸附型二抗提高抗体专一性


4.在哪测?

做什么应用,用什么抗体

a.环境不同,依应用挑抗体

抗体挑选的四个原则

b.做IP实验时,挑选EasyBlot二抗,去除重轻链干扰

抗体挑选的四个原则



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