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GeneTex超强WB发光底物

2021-05-18
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免疫印迹试验(Western blot)是利用抗体与抗原间的专一性结合来侦测特定蛋白质的表现,为现代生物化学、细胞生物学、免疫遗传学中常见的实验方法,也被广泛应用于蛋白表达水平的研究、抗体活性检测和早期疾病诊断等多个方面。

免疫印迹试验的技术是结合蛋白质胶体电泳 (gel electrophoresis)的高度解析力、抗体的专一性以及酵素的敏感性,使得科学家们得以在复合物中大海捞针般的寻找蛋白质的存在。一开始以电泳将蛋白质进行大小排列与分离,再利用电场将蛋白质转印到膜上,接着,拥有抗原表位的蛋白质分子就可被抗体(一抗)特异性识别并与之结合。在此基础上,酶或荧光标记的二抗再进一步识别并结合一抗,通过与底物反应显色来观察目标蛋白的表现。


Western blot若利用酵素反应呈色,由于受质的不同,显色的方法可区分为:

一、化学冷光法: Chemiluminescent-based signal detection。

二、直接呈色法:Colormetirc/Chromogen-based signal detection。

三、荧光呈色法:Fluorescent substrate-based signal detection。

 

发表文献上,又以化学冷光法为最常使用及最方便的呈色方法

化学冷光法(Chemiluminescent-based signal detection)的原理是利用二抗接上辣根过氧化物酶(HRP),在H2O2存在时,HRP会氧化化学发光物质鲁米诺(lumino,氨基苯二酰一肼)而发出冷光,加上化学增强剂的作用,冷光强度可以增大1,000倍以上。化学冷光法操作简便,只需将两种显色底物等体积混合,再将转印后的膜覆盖在上进行呈色反应,后续讯号侦测可藉由底片感光、显影、定影等冲洗步骤,或是自动化光学检测仪器来得到实验结果。


GeneTex超强WB发光底物

图一: 化学发光底物作用示意图

 

GeneTex 开发的Trident HRP substrate (化学发光底物)系列产品,原本仅供公司内实验室使用,因客户询问度高,且经过上万笔实验测试,2016年正式将其产品化,提供给客户使用。



GeneTex Trident HRP substrate系列产品优势:

1.灵敏度高:

优于市面产品(见图), 最高可检测到飞克 (femtogram ;10-15 g)级的蛋白

2.稳定性强:

A、B试剂单独存放28℃, 避光条件下可保存12个月

3.节约时间:

不需做条件优化, 入门新生立即可轻松上手

4.节省样品: 

对于样品珍贵或是表达量少的蛋白, 仅需少量蛋白即可侦测

5. 背景值低:杂讯少, 讯号强



产品名

Trident plus Western HRP Substrate

Trident pico Western HRP Substrate

Trident femto Western HRP Substrate

货号

GTX400006

GTX17435

GTX14698

应用与特色

一般日常操作

长时间或多次曝光

微量蛋白

灵敏度

皮克picogram

(10-10~10-12)

皮克

picogram (10-12)

飞克

femtogram (10-15)

包装大小

500 ml

100 ml

500 ml

100 m

200 ml

人民币售价

2,499

999

2,999

1,899

3,299



图二:化学发光底物飞克级蛋白测试

GeneTex超强WB发光底物


图三:化学发光底物皮克级蛋白测试



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